科研速递论坛

标题: 常用溶液的配置 [打印本页]

---

作者: univbio    时间: 2015-12-10 11:07
标题: 常用溶液的配置


·         磷酸盐缓冲液（PBS） 将8g氯化钠、0.2g氯化钾、1.44g磷酸氢二钠和0.24g磷酸二氢钾溶解于800ml蒸馏水中，用盐酸调pH至7.4，加蒸馏水定容至1000ml，分装，高压灭菌，室温保存。
·         
·         0.5mol/L EDTA 将186.1g EDTA·2Na·2H2O溶解于蒸馏水中，用NaOH调节溶解pH至8.0，加双蒸水定容至1000ml，分装，高压灭菌，室温保存。
·         
·         裂解液  氯化氨8.29g、碳酸氢钾1.10g、EEDTA·2Na 0.029g、双蒸水加至1000ml，用0.22um滤膜过滤，4度保存。
·         
·         4%固定缓冲液（储备液）4.0g多聚甲醛，加新鲜配置的PBS至100ml,加热到56度溶解，完全溶解后，用滤纸过滤，再用0.22um滤膜过滤，-20度冰冻保存。
·         
·         1%固定缓冲液（应用液）将4%固定缓冲液解冻后，用新鲜配置的PBS稀释成1%，充分混匀，1个月内用完。
·         
·         破膜剂 将0.1g皂素、0.1gNaN3及1.0g牛血清白蛋白溶解于100mlPBS（pH7.4)中。4度保存。无牛血清白蛋白时，可加入1%体积的小牛血清代替。
·         
·         Hanks液 配方如下：
1.    原液A NaCl 160g，MgSO4·7H2O 2g，KCl 8g，MgCl2·6H2O2g，CaCl2 2.8g，溶于1000ml双蒸水。

2.    原液B (1)Na2HPO4·12H2O3.04g，KH2PO4 1.2g，葡萄糖20.0g，溶于800ml双蒸水。(2)0.4%酚红溶液：取酚红0.4g，置玻璃研钵中，逐滴加入0.1N NaOH并研磨，直至完全溶解，约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中，用双蒸水洗去研钵中残留酚红液，并入量瓶中，最后补加双蒸水至100 ml。 将(1)和(2)混合，补加双蒸水至1000ml。即为原液B。

3.     应用液 原液A 1份，原液B 1份，双蒸水18份，混合后，分装于200ml小瓶中，0.1MPa高压蒸汽灭菌15分钟，临用前用无菌的5.3%
NaHCO3调pH至7.2~7.6。

---

欢迎光临 科研速递论坛 (http://expaper.cn/)

Powered by Discuz! X2.5